JC-1 線粒體膜電位熒光探針

溫馨提示：見我司整理線粒體熒光探針產(chǎn)品專題。

產(chǎn)品標簽

Rhodamine 123 羅丹明123；JC-1；JC-10；CCCP；CAS：62669-70-9

產(chǎn)品信息

【溫馨提示1】：我司懋康生物提供JC-1線粒體膜電位檢測試劑盒（MX3204-100T），含實驗所需的緩沖液和陽性對照，使用更方便，結(jié)果更直觀。

【溫馨提示2】：我司懋康生物提供JC-1的升級產(chǎn)品JC-10（MX3206-1MG，MX3207-100T），后者具有更好的水溶性，能更好的加載進入細胞，結(jié)果更準確。

產(chǎn)品描述

JC-1 是一種廣泛用于檢測線粒體膜電△Ψm位的理想熒光探針。JC-1染料以電勢依賴性的方式積聚在線粒體內(nèi)，可以用來檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位。正常線粒體內(nèi)，JC-1聚集在線粒體基質(zhì)中形成聚合物，聚合物發(fā)出強烈的紅色熒光（Ex=585 nm, Em=590 nm）；不健康的線粒體由于膜電位的下降或喪失，JC-1只能以單體的形式存在于胞漿中，產(chǎn)生綠色熒光（Ex=514 nm, Em=529 nm）。JC-1不僅可用于定性檢測，因顏色的變化可以非常直接的反映出線粒體膜電位的變化。也可以用于定量檢測，因線粒體的去極化程度可以通過紅/綠熒光強度的比例來衡量。觀察時，只需使用常規(guī)的觀察紅色熒光和綠色熒光的設置即可。

本品以凍干粉形式提供，CAS NO. 3520-43-2 ，細胞培養(yǎng)級。用于檢測細胞的線粒體膜電位時常用的濃度范圍為1～20 µg/ml，對于很多細胞適宜采用的工作濃度為10 µg/ml。

產(chǎn)品特性

1） CAS NO：3520-43-2

2） 化學名：5,5‘,6,6’-Tetrachloro-1,1‘,3,3’-tetraethylbenzimidazolylcarbocyanine iodide

3） 分子式：C₂₅H₂₇Cl₄IN₄

4） 分子量：652.23 g/mol

5） 純度：＞95%（HPLC）

6） 外觀：紅褐色粉末

7） 溶解性：溶于DMSO、DMF，幾乎不溶于水

8） Ex/Em：單體形式（monomer form）：Ex=514 nm, Em=529 nm；

聚合物形式（J-aggregate form）：Ex=585 nm, Em=590 nm；

注意事項

• JC-1是光敏感性的，所有染色步驟的操作過程中避免強光接觸。

• JC-1染色完成后，立即進行后續(xù)的結(jié)果分析非常必要；

3） 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用方法

1. 染色工作液制備

1） JC-1儲存液制備：將JC-1粉末室溫回溫20min左右，直接加1ml 無水DMSO到5mg粉末，顛倒混勻

使其充分溶解后，即得到5mg/ml的儲存液。溶液單次用量分裝存于-20℃，避光干燥且避免反復凍融。

• JC-1工作液制備：將凍存的儲存液置于室溫充分融化，之后用緩沖液或者預熱的培養(yǎng)基直接稀釋儲存液（5 mg/ml）到需要的工作濃度，邊震蕩邊稀釋，充分混勻。為了去除任何不溶顆粒，建議13,000 x g離心工作液1 min，小心吸取上清轉(zhuǎn)移到新的管子內(nèi)。整個過程要避光操作。

【注意】：因JC-1不溶于水，很可能在稀釋到工作液的過程中形成聚集顆粒，建議細胞染色前用離心或者過濾的方法去除這些顆粒后再使用。

• JC-1染色步驟（流式細胞儀）

數(shù)據(jù)分析：

含有紅色JC-1聚集物的健康細胞線粒體用FL2通道檢測；含有綠色JC-1單體的凋亡或不健康細胞用FL1（FITC）通道檢測。

• JC-1染色步驟（熒光顯微鏡）

A． 懸浮細胞

B． 貼壁細胞

• JC-1染色步驟（熒光酶標儀）

1） -7）同上JC-1染色步驟（流式細胞儀）；

8） 用0.3 ml緩沖液重懸細胞；然后按照每孔0.1 ml的量將染色好的細胞轉(zhuǎn)移到黑色的96孔板內(nèi)，即可進行熒光酶標板分析。【注意】：請馬上進行熒光顯微分析，此細節(jié)重要。

數(shù)據(jù)分析：

健康細胞，JC-1單體聚集形成聚合物，線粒體呈現(xiàn)強烈的紅色熒光（激發(fā)波長550 nm，發(fā)射波長600 nm）。而凋亡或壞死細胞內(nèi)JC-1以單體形式存在，線粒體呈強烈的綠色熒光（激發(fā)波長485 nm, 發(fā)射波長535nm）。之后計算紅色熒光信號與綠色熒光信號的比值，用來判斷細胞健康程度。

相關產(chǎn)品：

— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作，主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信"的經(jīng)營理念。堅持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。

JC-1  線粒體膜電位熒光探針 細胞增值

JC-1  線粒體膜電位熒光探針 細胞增值