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5-Fluoroorotic Acid (5-FOA) 5-氟乳清酸一水合物 克隆與表達(dá)分析

5-Fluoroorotic Acid (5-FOA) 5-氟乳清酸一水合物 克隆與表達(dá)分析

簡(jiǎn)要描述:

5-Fluoroorotic Acid (5-FOA) 5-氟乳清酸一水合物 克隆與表達(dá)分析,用于酵母反選是一種常用的分子遺傳篩選方法。酵母菌質(zhì)粒清除、質(zhì)粒穿梭、等位置換和雙雜交篩選都會(huì)用到5-FOA。

產(chǎn)品時(shí)間:2017-09-02

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5-Fluoroorotic Acid (5-FOA) 5-氟乳清酸

 

搜索關(guān)鍵詞:

5-FOA 5-氟乳清酸;URA3基因 Orotine-5'-monophosphate (OMP) decarboxylaseCounter-selection agent 反向篩選劑CAS220141-70-8

 

產(chǎn)品描述:

5-氟乳清酸(5-Fluoroorotic Acid5-FOA)用于酵母反選是一種常用的分子遺傳篩選方法。酵母菌質(zhì)粒清除、質(zhì)粒穿梭、等位置換和雙雜交篩選都會(huì)用到5-FOA5-FOA自身對(duì)酵母細(xì)胞無(wú)毒,但功能型URA3基因能編碼表達(dá)乳清酸核苷-5′-單磷酸脫羧酶(OMP脫羧酶),將其轉(zhuǎn)化為有毒形式(如5-氟尿嘧啶),從而使得酵母細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)。因此,在添加尿嘧啶的5-FOA培養(yǎng)基中,攜帶URA3突變基因的酵母菌能正常生長(zhǎng)。5-FOA主要用于釀酒酵母Saccharomyces cerevisiaeURA3)的鑒定和篩選,雖然曾用于其他菌株,包括粟酒裂殖酵母Schizosaccharomyces pombeURA4 and URA5),白色念珠菌Candida albicansURA3)和大腸桿菌E. coli pyrF)。酵母雙雜交系統(tǒng)中5-FOA的使用允許構(gòu)建激活結(jié)構(gòu)域雜交文庫(kù)來(lái)鑒定蛋白-蛋白相互作用。

 

產(chǎn)品應(yīng)用:

1. 檢測(cè)酵母URA3基因表達(dá);

2. 構(gòu)建酵母雙雜交文庫(kù);

3. 其他酵母遺傳學(xué)領(lǐng)域包括基因替換,可移動(dòng)遺傳因子分析和基因突變鑒定研究。

 

重要參數(shù)

1. CAS NO703-95-7, 220141-70-8, 207291-81-4

2. 同義名:5-fluoro-2,6-dioxo-1,2,3,6-tetrahydropyrimidine-4-carboxylic acid; 5-Fluorouracil-4-carboxylic acid; 5-Fluoro orotic acid; 2,6-Dihydroxy-5-fluoropyrimidine-4-carboxylic acid;

3. 純度:≥98%

4. 外觀:類(lèi)白色至淡黃色粉末

5. 熔點(diǎn):~258°C(高溫非常穩(wěn)定,如煮沸和高壓滅菌)

6. 溶解性:溶于DMSO,微溶于水,乙醇,甲醇

 

使用方法【詳見(jiàn)懋康整理內(nèi)容】

一、5-FOA培養(yǎng)基配置方法(以粉末形式)

二、5-FOA培養(yǎng)基配置方法(以?xún)?chǔ)存液形式)

 

常見(jiàn)問(wèn)題(FAQs):

Q1. 如何保存5-FOA

A1. 5-FOA粉末可置于4°C 短期保存,-20°C長(zhǎng)期保存。根據(jù)產(chǎn)品特性溶解配置儲(chǔ)存液,需避光置于4°C 短期保存。小量分裝后-20°C長(zhǎng)期保存,可穩(wěn)定保存6個(gè)月。

Q2. 5-FOA選擇性培養(yǎng)基pH是多少?

A2.大于pH 4.5條件下5-FOA選擇性被破壞,*的問(wèn)題在于質(zhì)子化形式的FOA會(huì)滲透進(jìn)入細(xì)胞。一般情況標(biāo)準(zhǔn)配方配置的平板pH=2.8。在pH=66.2時(shí)5-FOA*無(wú)活性,pH =5.4時(shí)5-FOA活性很好,pH=4或更低時(shí)5-FOA活性達(dá)到100%正常情況配置5-FOA培養(yǎng)基不用調(diào)pH

Q3. 預(yù)制的5-FOA選擇性平板能保存多久?

A3. 絕大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室保存5-FOA預(yù)制平板數(shù)月(3-6個(gè)月)。有的實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)顯示能放9個(gè)月和>12個(gè)月(4°C存放),圈上封口膜防止干燥。

Q4. 5-FOA使用濃度?

A4. FOA1mg/ml)在酵母分子遺傳學(xué)中常用作選擇性試劑;在Ura+細(xì)胞群體重篩選出Ura-細(xì)胞;篩選釀酒酵母菌乳清酸核苷-5′-單磷酸脫羧酶(OMP脫羧酶)突變株。FOA0.1mg/ml)用來(lái)正篩選尿嘧啶營(yíng)養(yǎng)缺陷型的硫依賴(lài)型嗜熱古細(xì)菌(Sulfolobus acidocaldarius)。

 

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5-Fluoroorotic Acid (5-FOA) 5-氟乳清酸

MF2521-1G

1g

386

5-Fluoroorotic Acid (5-FOA) 5-氟乳清酸

MF2521-5G

5g

1386

5-Fluoroorotic acid monohydrate (5-FOA) 5-氟乳清酸一水合物

MF2522-500MG

500mg

316

5-Fluoroorotic acid monohydrate (5-FOA) 5-氟乳清酸一水合物

MF2522-1000MG

1g

556

 

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產(chǎn)品名稱(chēng)

貨號(hào)

規(guī)格

 

YNB Without Amino Acids 酵母氮源基礎(chǔ)(無(wú)氨基酸)

MS6305-100G

100g

330

Minimal SD Base SD基礎(chǔ)培養(yǎng)基

MS6312-267G

267g

768

DO Supplement -Ura

MS6319-10G

10g

418

Uracil 尿嘧啶

MS0248-25G

25g

80

D-(+)-Glucose D-葡萄糖(無(wú)水)

MS0821-500G

500g

75

Agar, Plant Tissue Culture 瓊脂粉(植物組培級(jí))

MX7401-500G

500g

180

 

注意事項(xiàng)

1. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

2. 本站所有產(chǎn)品僅做科研用,不能用作臨床診斷和醫(yī)療診治用途。

 

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

 

 

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5-Fluoroorotic Acid (5-FOA) 5-氟乳清酸一水合物 克隆與表達(dá)分析

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